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IL TEST DI PROLIFERAZIONE
a cura di Annamaria Colacci, Monica Vaccari, Paola Silingardi, Wolfango Horn
 

Questo saggio viene utilizzato per verificare un eventuale effetto sul ritmo proliferativo imputabile ad una tossicità ritardata o da accumulo dei composti.
Cellule in crescita esponenziale vrngono seminate in piastre e incubate in condizioni di coltura standard. Come controlli negativi vengono usate cellule non trattate e cellule trattate con il solo solvente.
Le cellule vengono esposte due volte alla settimana all'agente o a combinazioni di agenti, in corrispondenza dei cambi di mezzo di coltura.
Le cellule vengono poi staccate con tripsina e contate ogni 24 ore fino ad oltre il raggiungimento della confluenza (fase di plateau), per una durata complessiva di 2 settimane.

Cellule BALB/c: scansione 3D

Il conteggio viene eseguito risospendendo le cellule in trypan blue, colorante ad inclusione passiva, per ottenere un'ulteriore indicazione sulla vitalità cellulare.
Le medie giornaliere di cellule vitali vengono riportate in un grafico al fine di evidenziare alterazioni significative del ciclo di crescita indotte dall'agente in saggio.

Curve di crescita BALB/c 3T3